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细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒

简要描述:产品概述 product description 贝博® BBcellProbe® 细胞周期检测试剂盒是利用细胞内DNA能够和荧光染料结合的特性,细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同,流式细胞仪检测的荧光强度也不一样来检测细胞周期。 细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,通常由G0/G1期、S期、G2期和M期组成。G1期:细胞开始RNA和蛋白质的合成,但DNA含量仍保持二倍体。S期:DNA开始合成,这时细胞核内DNA的含量介于G1期和G2期之间。当DNA复制结束成为4倍体时,细胞进入G2期。G2期的细胞继续合成RNA及蛋白质,直到进入M期。因此,单纯从DNA含量无法区分G2期和M期。一旦有丝分裂发生,细胞分裂成两个细胞,这两个细胞或者进入下一个细胞周期......

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2025-06-27
  • 访  问  量:23

详细介绍

保存温度
-20℃避光
注意事项
1.染液短期2周内可以2-8℃保存。染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.试剂拆封后请尽快使用完!

有效期
1年
检测方法
流式细胞仪
适用样本
1.悬浮细胞 2.贴壁细胞
产品应用
流式细胞仪
仪器准备
1.流式细胞仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS 缓冲液(pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X))
2.或者HBSS(Hank's Balanced Salt Solution)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
2.使用含EDTA的细胞消化液。
3.洗涤细胞离心转速不可超过800×g。
4.乙醇固定时离心大概采用2000×g力5分钟,离心力太小可能部分细胞难以沉淀。 5.固定时在振荡器上轻轻振荡细胞,并缓慢滴加75%乙醇,直接加入会导致细胞团聚的现象,很难重悬成单细胞。或者先用冷PBS悬浮细胞,充分悬浮,使细胞充分分散成单细胞。之后缓慢加入无水乙醇,终浓度为70-90%乙醇。乙醇固定之后须无细胞沉淀。


使用方法
1. 收集样本细胞,细胞数量在1-5*106个。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次。
3. 在15ml离心管中,用500 μl PBS重悬细胞。
4. 慢慢滴加冷的无水乙醇或95%乙醇至终浓度为70%-80%冰冻乙醇。-20℃固定1小时或4℃固定过夜。
5. 在1000g离心10分钟,弃上清,收集细胞。
6. 用冷PBS洗涤细胞一次。
7. 用500 μl冷PBS重悬细胞。
8. 加入Rnase A溶液20 μl, 37℃水浴30分钟。
9. 400目筛网过滤。
10. 在1000g离心10分钟,弃上清,收集细胞。
11. 加入400 μl PI染液重悬细胞,轻轻混匀后4℃避光孵育30分钟-1小时。
12. 流式检测结果。激发波长为488nm。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。
常见问题分析
1.染色后找不到细胞?
固定细胞可能难以离心沉淀;固定细胞可能成团;固定细胞膜容易损伤成碎片。操作过程中注意以上几点。

2.可以不固定细胞吗?
本试剂盒可以用于非固定细胞的周期检测。
参考文献
1.Meng Zhang, et al.
lnc9141-a and -b Play a Different Role in Bovine Myoblast Proliferation, Apoptosis, and Differentiation
Molecular Therapy-Nucleic Acids 2019 (IF=5.919)

2.Jiebing Yang, et al.
Phenylboronic acid-modified polyamidoamine-mediated delivery of short GC rich DNA for hepatocarcinoma gene therapy
Biomaterials science 2019 (IF=5.831)

3.Wenqi Chen, et al.
Chondroitin sulfate-functionalized polyamidoamine as a tumor-targeted carrier for miR-34a delivery
Acta Biomaterialia 2017 (IF=6.383)

4.Feng Liu, et al.
Interleukin-6-stimulated progranulin expression contributes to the malignancy of hepatocellular carcinoma cells by activating mTOR signaling
Sci Rep. 2016; 6: 21260 (IF 5.228)

5.Fei Fei, et al.
The number of polyploid giant cancer cells and epithelial-mesenchymal transition-related proteins are associated with invasion and metastasis in human breast cancer
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 2015 (IF 6.217)

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