总巯基检测试剂盒-微孔板

简要描述：产品概述 product description 贝博TM BBcellProbe® 总巯基检测试剂盒是利用经典的Ellman法进行总巯基检测的试剂盒。试剂盒准确性高，重复性和抗干扰性强，使用方便，可用于测各种动物的血清/血浆、组织、细胞、培养液以及植物组织样本等。生物体内活性巯基（SH）主要包括巯基和蛋白质巯基。巯基能够修复氧化损伤的蛋白质，参与活性氧清除。蛋白质巯基主要存在于半，是蛋白质结构和生物体内某些氧化还原反应重要基团，在蛋白质结构中2个巯基脱氢而形成的双硫键，使相邻多肽得以连接．对于维持蛋白质完整结构作用十分重要。巯基还是很多酶的活性基团，一些重金属盐如Hg2+等与酶巯基结合，影响酶活性。巯基化合物与机体许多机能活动，药物及毒物的作用以及某些疾病的发生发展有着密切关系。所......

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厂商性质：生产厂家
更新时间：2024-05-09
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细胞分析

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详细介绍

保存温度

2-8℃ 避光

注意事项

开盖后组份按要求条件保存。

有效期

6个月

检测方法

分光光度计

适用样本

血清、血浆、尿液、细胞培养上清、细胞裂解液、组织裂解液

产品应用

分光光度计

仪器准备

1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰盒

试剂准备

1.生理盐水
2.纯水
3.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.96孔板
2.吸头

使用注意事项

1.试剂B2干粉开盖使用前先敲入瓶底部，防止开盖时洒落导致损失。
2.血清/培养液等液体样本直接检测或用生理盐水稀释后检测。
3.检出限为10μmol/L。

使用方法

1. 样品准备
组织样本：按照组织质量（g）：生理盐水体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 生理盐水）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清，培养液：直接测定。

2. 试剂配制：
使用前，准确吸取10ml试剂B1加入试剂B2干粉，充分溶解混匀，即成试剂B工作液，4℃避光保存。

3. 酶标仪预热30min，调节波长至412nm，蒸馏水调零。

4. 总巯基的测定
按下表在96孔板中加入试剂，对照孔每个样品均做。
混匀，25℃静置10min，测定412nm 吸光值。
ΔA=A 测定-A 对照。
【注】：
 如果OD值太大，可以将样品用试剂A稀释后再检测。

5. 计算
血清中总巯基含量（mmol/L）
=ΔA ÷0.8618×V 反总÷V 样×103
=5800×ΔA

组织细胞中总巯基含量（mmol/g）
（1）按样本重量计算
总巯基含量（μmol/g 鲜重）
=ΔA ÷0.8618×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）
=5.8×ΔA÷W

（2）按样本蛋白浓度计算
总巯基含量（μmol/mg prot）
=ΔA ÷0.8618×V 反总÷（V 样×Cpr）
=5.8×ΔA÷Cpr

【注】：
V 反总：反应总体积，0.2mL；
V 样：反应中样品体积，0.04mL；
V 样总：加入提取液体积，1mL；
W：样品质量，g ；
Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；
103 ：1mmol/ L=103μmol/ L

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