BB-410382 Annexin V Alexa Fluor 660 / NucGreen 细胞凋亡检测试剂盒
BB-41039 Annexin V-PE-Cyanine5 细胞凋亡检测试剂盒
BB-4104 细胞周期检测试剂盒(PI)
BB-41043 细胞周期检测试剂盒
BB-41044 细胞周期检测试剂盒
BB-41045 细胞周期检测试剂盒-绿色荧光
BB-41046 细胞周期检测试剂盒-蓝色荧光
BB-41047 细胞周期检测试剂盒-深红色荧光
BB-41048 细胞周期检测试剂盒-橙色荧光
BB-41049 细胞周期检测试剂盒
BB-410461 细胞同步化试剂盒
BB-4105 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)
BB-41051 线粒体膜电位检测试剂盒(Rho123法)
BB-41052 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10法)
BB-41053 线粒体膜电位检测试剂盒(TMRE法)
BB-41054 线粒体膜电位检测试剂盒(TMRM法)
贝博生物专注于生命科学研究用试剂产品的研究、开发、市场推广和技术服务。致力于为中国广大客户提供量身定制的科研用试剂产品和专业技术服务,帮助科研人员加速生物领域的研究进展。 贝博生物将以高品质的产品和服务打造实力试剂品牌。
目前已上市了600多种蛋白提取试剂盒(动物、植物、细菌、昆虫、酵母等样本及细胞器提取)及上千种的细胞检测的相关产品-细胞凋亡、增殖毒性、细胞周期、膜电位检测、细胞器荧光探针、活性氧ROS检测、细胞自噬、细胞耗氧OCR、细胞外酸化率ECAR、缺氧检测、粘附检测、钙离子检测、膜通透性转换孔检测、膜流动性检测、外泌体、囊泡提取等。
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使用 Annexin V/PI 试剂盒时,如何避免假阳性 / 假阴性结果?
实验误差多源于细胞状态与操作细节,可通过以下措施优化:
1. 细胞处理关键步骤
消化避免过度:
贴壁细胞消化时,胰酶作用时间过长会导致细胞膜损伤,引起 PS 外翻(假阳性)。
优化方案:用不含 EDTA 的胰酶消化,显微镜下观察细胞变圆即终止(通常≤5 分钟),并用含血清培养基中和胰酶。
避免细胞凋亡诱导:
离心速度过高(如 > 1500 rpm)或重悬时吹打剧烈,可能人为诱导凋亡(假阳性)。
优化方案:离心速度控制在 800-1000 rpm×5 分钟,重悬时用移液枪轻柔吹打。
2. 染色与检测注意事项
缓冲液与温度控制:
Annexin V 结合 PS 依赖 Ca²⁺,需使用试剂盒配套的 Binding Buffer(含 Ca²⁺),避免用 PBS 稀释(可能降低 Ca²⁺浓度)。
染色需在冰浴或 4℃进行,防止常温下细胞继续凋亡(假阳性)。
PI 染色时机:
染色后需立即上机检测(≤1 小时),若延迟检测,PI 可能渗入早期凋亡细胞(假阳性)。
3. 对照设置
阳性对照:用 1 μM 喜树碱(Camptothecin)处理细胞 4 小时,诱导典型凋亡,验证试剂盒有效性。
阴性对照:
未处理细胞:排除自发凋亡;
单染 Annexin V 或 PI:排除非特异性结合(如 PI 单染时,活细胞应无荧光)。