还原型（GSH）检测试剂盒2

简要描述：产品概述 product description GSH是一种低分子自由基清除剂，它可清除O2-、H2O2、LOOH。还原型是蛋氨酸、和半组成的一种小分子肽，是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物，并且是GPX和GST两种酶类的底物，为这二种酶分解氢过氧化物所必需，并且能稳定含巯基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤。最近还证明GSH也参与使VE恢复到还原态的作用。GSH在防止动脉粥样硬化、冠心病、防衰老、抗肿瘤、防老年性痴呆等疾病的预防、恢复、治疗的研究过程中起到重要参考作用。还原型（GSH）可与二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成一种黄色化合物，可在405nm下比色定量测定还原型（GSH）含量。本试剂盒测仅用于科研领域，不可用于临床诊断或其他用途。贝博®......

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厂商性质：生产厂家
更新时间：2024-11-25
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详细介绍

保存温度

2-8℃ 避光

注意事项

开盖后组份按要求条件保存。

有效期

6个月

检测方法

微孔板，酶标仪

适用样本

血清血浆/全血/组织

产品应用

微孔板，酶标仪

仪器准备

1.酶标仪
2.离心机

试剂准备

1.双蒸水

耗材准备

1.一次性手套
2.吸头

使用注意事项

1.血液中的GSH几乎全部存在于红细胞内，可以用每升全血中GSH的克数来表示，也可用每克Hb中GSH含量来表示；
2.计算时应用消光系数，故比色计要校正波长。用标准管计算较方便、准确；
3.吸取上清时，用带刻度的5ml滴管，或者移液器，避开表面的一层薄膜，插到上清液中吸取2ml做显色反应；
4.每批实验做2个标准管、空白管，以减少操作误差；

使用方法

试剂工作液配制：
1. 试剂A为过饱和溶液，如有结晶，则取上清使用；

2. GSH标准溶剂工作液：
溶剂储备液：双蒸水=1：9稀释，即为GSH标准溶剂工作液，现用现配。

3. 1mmol/LGSH标准溶液的配制：GSH分子量为307，每次测定前将3.07 mg的GSH标准品加到10mlGSH的溶剂工作液中，混匀，现用现配。

4. 20μmol/LGSH标准溶液的配制:取1mmol/LGSH标准溶液0.2ml加GSH标准溶剂工作液9.8ml，现用现配。

样本的前处理：
1. 培养细胞：将收集好的细胞，用PBS清洗1~2次，低速离心收集沉淀细胞，再加入0.3-0.5ml 0.1M pH7.4的等渗PBS缓冲液重悬细胞，超声或手动研磨破碎细胞后待测；
上清液制备：
取破碎后的细胞悬液0.1ml,加0.1ml试剂A混匀，3500转/分离心10分钟，取上清液1ml待测；

2. 血清（浆）：取0.05ml,加试剂A0. 2ml混匀，3500转/分离心10分钟，取上清液待测；

3. 全血样本的处理：1:9溶血液的制备：取0.1ml肝素抗凝全血加双蒸水0.9ml，充分混匀，直至透亮为止；
上清液制备：取0.05ml,加试剂A0. 2ml混匀，3500转/分离心10分钟，取上清液待测；

4. 组织样本：10%匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9比例加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10min，取上清液待测；
上清液制备：取0.1ml,加0. 1ml试剂A 0. 1ml混匀，3500转/分离心10分钟，取上清液待测；

计算：

（1）全血计算公式：
全血中GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x 样本前处理 x 样本测定前
（umol/L）标准OD值 - 空白OD值（20umol/L）稀释倍数（5倍）稀释倍数（10倍）

（2）细胞及组织计算公式：

GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x样本前处理 ÷ 待测匀浆蛋白
（umol/gprot）标准OD值 - 空白OD值（20umol/L）稀释倍数（2倍）浓度（gprot/L）

（3）血清（浆计算公式）

GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x样本前处理
（umol/L）标准OD值 - 空白OD值（20umol/L）稀释倍数（5倍）

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