碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒5

简要描述：产品概述 product description 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。贝博TM BBcellProbe® (磷酸苯二钠法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二钠比色法，其检测原理是磷酸苯二钠在碱性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸，通过酶标仪测定510nm处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。本试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷......

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厂商性质：生产厂家
更新时间：2024-05-09
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细胞分析

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详细介绍

保存温度

2-8℃ 避光

注意事项

开盖后组份按要求条件保存。

有效期

6个月

检测方法

分光光度计

适用样本

血清血浆/组织/细胞

产品应用

分光光度计

仪器准备

1.可见分光光度计
2.恒温水浴锅
3.离心机
4.漩涡混匀器
5.移液器

试剂准备

1.纯水

耗材准备

1.离心管
2.吸头

使用注意事项

1.待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂。
2.样品避免反复冻融。
3.如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定。
4.所测样本的值高于标准曲线的上限，应稀释样品后重新测定。
5.空白管如果显红色，说明ALP显色液不可用，应丢弃。
6.加入显色基液时，应迅速，并且及时混匀，否则显色不充分。

使用方法

样品测定：
1. 配制标准品工作液
取出试剂D：标准品1mg/ml恢复至室温后，取0.1ml溶解于1.9ml的试剂E：ddH2O中，使浓度为0.05mg/ml，即为标准品工作液。
参照下表稀释系列标准品溶液

2. 样品准备：
1) 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要需适当匀浆；低速离心取上清，-80℃冻存，用于碱性磷酸脂酶的检测；
2) 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定；尿液通常也可以直接用于测定，-80℃冻存，但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了血浆或血清但不加底物的对照；
3) 高活性样品：如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5~10倍后检测。

3. 加样：
依照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免气泡的产生。如果样品中的碱性磷酸酯酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再测定。样品的检测能设置平行管。
立即混匀，510nm，0号管（ddH2O）调零，测各管吸光度。

计算公式：
碱性磷酸酶金氏活性单位的定义：
在37℃条件下，100ml待测样品与显色底物（即ALP显色液所含物质）作用15分钟，产生1mg酚为一个金氏单位。

以系列标准品工作液（1~5号管）对应的金氏单位为X轴，以相应的标准管吸光度（1~5号管）为Y轴，绘制标准曲线。

以测定管与空白管的吸光度值的差额为实际的吸光度，用该差值与标准曲线进行对比，算出酶活力单位。

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